کاربرد روش تشخیص UV – vis HPLC برای تعیین سریع لیکوپن و بتا – کاروتن در سبزیجات

هدف این مقاله بهینه‌سازی روش HPLC برای تعیین لیکوپن و بتا – کاروتن در سبزیجات و مقایسه آن با روش استاندارد اسپکتروفتومتری است. در میان شرایط مختلف مورد مطالعه مناسب‌ترین آن‌ها برای نمونه‌های ما عبارتند از: استخراج با هگزان / استون / اتانول (‏۵۰: ۲۵: ۲۵ v / v / v)‏، تبخیر لایه هگزان، انحلال عصاره خشک در THF / ACN / متانول (‏۱۵: ۳۰: ۵۵ v / v / v)‏و تزریق در یک ستون C۱۸ با متانول / ACN (‏۹۰: ۱۰ v / v)‏+TEA 9 میکرومتر به عنوان فاز متحرک (ɸ= ۰.۹ ml/min) و λتشخیص = ۴۷۵ نانومتر. نمونه‌هایی که برای آنالیز در نظر گرفته شدند عبارت بودند از: گوجه‌فرنگی، هویج، فلفل، هندوانه، خرمالو و ازگیل. روش HPLC پیشنهاد شده تکرارپذیری کافی (‏ > RSD ۱۰ .۵ %)‏، دقت (‏۱۰۰ – ۱۰۹ % بازیابی)‏ و حد‌های تشخیص حساس (‏۰.۶ میکرومتر برای لیکوپن؛ ۰.۳ میکرومتر برای بتا کاروتن)‏، با آماده‌سازی ساده نمونه‌ها (‏استخراج مستقیم یک مرحله‌ای)‏ و زمان‌های کوتاه (‏۱۰ دقیقه) ‏برای تعیین مقدار لیکوپن و بتا کاروتن را نشان داد.

The purpose of this paper is to optimize an HPLC method for the determination of lycopene and β-carotene in vegetables and compare it with a spectrophotometric standard method. Among the different conditions studied the most suitable ones for our samples were: extraction with hexane/acetone/ethanol (50:25:25 v/v/v), evaporation of the hexane layer, dissolution of the dry extract in THF/ACN/methanol (15:30:55 v/v/v) and injection on a C18 column with methanol/ACN (90:10 v/v) + TEA 9 μM as mobile phase ( Φ = ۰.۹ ml/min) and λ detection = 475 nm. Samples considered for analysis were: tomato, carrot, pepper, watermelon, persimmon and medlar. The HPLC method proposed showed adequate reproducibility (RSD 10.5%), accuracy (100–۱۰۹% recovery) and sensitive detection limits (0.6 μM for lycopene; 0.3 μM for β-carotene), with a simple preparation of the samples (one step direct extraction) and short run times (10 min) for the quantification of lycopene and β-carotene